青花椒种质资源DNA鉴定技术方法

一、技术概述：
为解决青花椒品种外观相似、传统鉴别方法主观性强、效率低等问题，项目组基于基因组重测序技术，系统筛选出55569个不同花椒品种基因组结构变异（GSV）位点，并开发了一套高效、稳定的DNA分子标记鉴定体系。该技术通过设计对应基因座扩增引物，结合PCR扩增与PAGE凝胶电泳，可实现青花椒品种的快速、准确鉴别。

二、技术亮点：

高特异性标记开发： 从数万个候选位点中筛选出可用于品种鉴别的核心位点（如PA52、PA29等），确保检测结果稳定可靠。

标准化检测流程： 采用CTAB小量法提取DNA，建立10μl微量化PCR体系，配套标准化电泳与显影流程，提升检测效率。

多品种鉴别能力： 成功区分“江津九叶青”“云清1号”“四川藤椒”等品种，为品种权保护、良种选育与种质资源管理提供分子依据。

三、应用方向：

花椒新品种DUS测试（特异性、一致性、稳定性检测）

种质资源库建设与品种真实性鉴定

育种材料早期筛选与遗传背景分析